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热门检测 | 植物内源激素检测

动/植物理化检测

植物内源激素是调控植物生长发育、响应环境变化的关键因子。通过对植物内源激素的深入研究和应用，可以推动植物科学的发展，促进农业生产的可持续性，以及生态环境的保护和修复。

生长发育调控：植物内源激素（如生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸、乙烯和油菜素内酯等）在植物生长发育的各个阶段起着关键的调节作用，包括种子萌发、根系生长、叶片扩展、开花结实、衰老脱落等。通过检测内源激素水平，可以深入了解激素如何影响这些生理过程，为作物生长调节和提高产量提供理论依据。

逆境适应性研究：植物在遭受干旱、盐碱、低温、病虫害等逆境时，会通过调节内源激素平衡来增强自身的抗逆性。检测植物激素的变化，可以帮助科研人员揭示植物逆境应答的分子机制，为培育抗逆性强的作物品种提供方向。

果实成熟与保鲜：植物激素如乙烯在果实成熟过程中起主导作用，其含量的变化直接影响果实的成熟度和保鲜期。通过监测果实中乙烯及其他相关激素的动态变化，可以合理安排采收时机，优化采后处理和储存条件，延长货架期，提高农产品的市场竞争力。

分子生物学研究：植物内源激素的检测与分析是现代分子生物学研究的重要工具之一，有助于揭示激素合成途径、信号转导机制及激素间相互作用的复杂网络，推动基因功能研究、遗传改良和作物分子设计育种的进展。

环境监测与修复：植物内源激素的变化也可以作为环境监测的指标，反映土壤污染、重金属胁迫等环境问题。此外，通过调节植物内源激素水平，可以增强植物的修复能力，用于环境修复项目，如重金属超富集植物的筛选和应用。

指标		方法	样品	用量/g
生长素	吲哚乙酸IAA	液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
生长素	吲哚丁酸IBA	液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
细胞分裂素	反式玉米素tZ	液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
	顺式玉米素核苷cZR	液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
	异戊烯基腺嘌呤iP	液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
	异戊烯基腺嘌呤核苷iPR	液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
	二氢玉米素DZ	液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
	二氢玉米素核苷DZR	液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
	激动素6-KT	液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
	6-苄基腺嘌呤（6-BA）	液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
赤霉素	GA1、GA3、GA4、GA7等	液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
脱落酸	ABA	液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
水杨酸	水杨酸SA	液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
水杨酸	水杨酸甲酯MeSA	液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
茉莉酸	茉莉酸JA	液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
茉莉酸	茉莉酸甲酯MeJA	液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
赤霉素（GA1、GA3、GA4、GA5、GA7、GA8、GA9、GA12、GA20、GA24、GA44、GA53）、脱落酸ABA、脱落酸-β-葡糖基酯ABAGE、茉莉酸JA、水杨酸SA、吲哚-3-乙酸IAA、吲哚-3-丁酸IBA、N-（吲哚-3-乙酰）-L-天冬氨酸IAAsp、N-（羟吲哚-3-乙酰）-L-苯丙氨酸IAPhe、N-（羟吲哚-3-乙酰）-L-异亮氨酸IAILeu、N-（羟吲哚-3-乙酰）-L-丙氨酸IAAla、N-（羟吲哚-3-乙酰）-L-色氨酸IATrp、N-（羟吲哚-3-乙酰）-L-缬氨酸IAVal、N-（羟吲哚-3-乙酰）-L-亮氨酸IALeu		液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
6-苄基腺嘌呤6-BA、异戊烯基腺嘌呤iP、异戊烯基腺嘌呤核苷iPR、7-β-葡糖基-6-（异戊二烯基）腺嘌呤iP7G、9-β-葡糖基-6-（异戊二烯基）腺嘌呤iP9G、反式玉米素tZ、反式玉米素核苷tZR、顺式玉米素cZ、顺式玉米素核苷cZR、反式-7-β-葡糖基玉米素tZ7G、反式-9-β-葡糖基玉米素tZ9G、反式-O-β-葡糖基玉米素tZOG、反式-O-β-葡糖基-9-核糖基玉米素tZROG、二氢玉米素DZ、7-β-葡糖基二氢玉米素DZ7G、9-β-葡糖基二氢玉米素DZ9G、O-β-葡糖基二氢玉米素DZOG、O-β-葡糖基-9-核糖基二氢玉米素DZROG		液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
褪黑素MT		液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
		高效液相色谱法	鲜样，-80℃避光	动物 0.2
		高效液相色谱法	鲜样，-80℃避光	植物 10
油菜素内酯BRs（BL、CS、6DCS、28-HomoBL）		高效液相色谱法	鲜样，-80℃避光	2
1-氨基环丙烷-1-羧酸（ACC）		液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	1
乙烯		气相色谱法	鲜样，-80℃避光	10
独脚金内酯（5-脱氧独脚金醇、独脚金醇、Strigolactone GR24）		液相色谱-串联质谱法	鲜样，-80℃避光	2

指标		标准
生长素	吲哚乙酸IAA	Pan, XQ, Welti, et al. Quantitative analysis of major plant hormones in crude plant extracts by high-performance liquid chromatography-mass spectrometry
生长素	吲哚丁酸IBA
细胞分裂素	反式玉米素tZ
	顺式玉米素核苷cZR
	异戊烯基腺嘌呤iP
	异戊烯基腺嘌呤核苷iPR
	二氢玉米素DZ
	二氢玉米素核苷DZR
	激动素6-KT
	6-苄基腺嘌呤（6-BA）
赤霉素	GA1、GA3、GA4、GA7等
脱落酸	ABA
水杨酸	水杨酸SA
水杨酸	水杨酸甲酯MeSA
茉莉酸	茉莉酸JA
茉莉酸	茉莉酸甲酯MeJA
赤霉素（GA1、GA3、GA4、GA5、GA7、GA8、GA9、GA12、GA20、GA24、GA44、GA53）、脱落酸ABA、脱落酸-β-葡糖基酯ABAGE、茉莉酸JA、水杨酸SA、吲哚-3-乙酸IAA、吲哚-3-丁酸IBA、N-（吲哚-3-乙酰）-L-天冬氨酸IAAsp、N-（羟吲哚-3-乙酰）-L-苯丙氨酸IAPhe、N-（羟吲哚-3-乙酰）-L-异亮氨酸IAILeu、N-（羟吲哚-3-乙酰）-L-丙氨酸IAAla、N-（羟吲哚-3-乙酰）-L-色氨酸IATrp、N-（羟吲哚-3-乙酰）-L-缬氨酸IAVal、N-（羟吲哚-3-乙酰）-L-亮氨酸IALeu		NY/T 2871-2015 水稻中43种植物激素的测定液相色谱-串联质谱法
6-苄基腺嘌呤6-BA、异戊烯基腺嘌呤iP、异戊烯基腺嘌呤核苷iPR、7-β-葡糖基-6-（异戊二烯基）腺嘌呤iP7G、9-β-葡糖基-6-（异戊二烯基）腺嘌呤iP9G、反式玉米素tZ、反式玉米素核苷tZR、顺式玉米素cZ、顺式玉米素核苷cZR、反式-7-β-葡糖基玉米素tZ7G、反式-9-β-葡糖基玉米素tZ9G、反式-O-β-葡糖基玉米素tZOG、反式-O-β-葡糖基-9-核糖基玉米素tZROG、二氢玉米素DZ、7-β-葡糖基二氢玉米素DZ7G、9-β-葡糖基二氢玉米素DZ9G、O-β-葡糖基二氢玉米素DZOG、O-β-葡糖基-9-核糖基二氢玉米素DZROG		NY/T 2871-2015 水稻中43种植物激素的测定液相色谱-串联质谱法
褪黑素MT		吴艳迪. 葡萄褪黑素含量变化及其合成基因SNAT原核表达分析
		施龙清,解振兴,姜照伟等.水稻褐飞虱若虫和成虫褪黑素含量测定及比较
		赵琦,可燕,蒋嘉烨等.不同类型马齿苋的褪黑素含量测定
油菜素内酯BRs（BL、CS、6DCS、28-HomoBL）		Feifeng Huo, Xin Wang, Yehua Han, Yu Bai, et al. A new derivatization approach for the rapid and sensitive analysis of brassinosteroids by using ultra high performance liquid chromatography-electrospray ionization triple quadrupole mass spectrometry
1-氨基环丙烷-1-羧酸（ACC）		马莹莹,盖颖,陈伟奇等.一种用高效液相色谱-电喷雾/串联质谱(HPLC-ESI/MSn)定量检测植物组织中微量1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)含量的方法
乙烯		GH/T 1405-2022 果蔬贮藏过程中乙烯释放速率的测定气相色谱法
独脚金内酯（5-脱氧独脚金醇、独脚金醇、Strigolactone GR24）		叶儿翠,丁俊,冯钰锜.双层固相萃取-液相色谱/串联质谱法测定水稻中独脚金内酯[J].分析科学学报,2017,33(03):297-301.

液相色谱-串联质谱法

液相色谱-串联质谱法（Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry, LC-MS/MS）是目前检测植物内源激素最灵敏、特异且强大的技术之一，其在植物激素检测中的应用价值主要体现在以下几个方面：

高灵敏度与特异性：LC-MS/MS能够检测到极低浓度（达到pg/mL至fg/mL级别）的植物激素，且由于质谱的高分辨能力和选择性，能够有效区分结构相似的激素及其代谢物，减少假阳性结果，提高检测的准确性。

多目标同时检测：串联质谱技术允许在一次分析中同时测定多种植物激素，大大提高了分析效率，这对于研究激素间的相互作用和整体调控机制尤为重要。

样品适用范围广：LC-MS/MS方法适用于各种植物样本，包括叶片、根、种子、果实等，甚至是微小或难以处理的样本，如单个细胞或特定组织区域，这为深入研究激素的空间分布和动态变化提供了可能。

定量分析精确：通过内标法或同位素标记标准品，LC-MS/MS能够实现植物激素的绝对或相对定量，为植物生理学研究、作物改良及环境响应机制分析提供准确的数据支持。

自动化程度高：现代LC-MS/MS系统高度自动化，从进样、分离、检测到数据分析都可以自动完成，减少了人为误差，提高了分析的重现性。

流程概述

样品收集与保存

·首先，需从植物中收集目标组织或器官，如叶片、根、茎、花或果实。收集后立即冷冻保存，通常在-80°C条件下，以防止内源激素的降解或代谢变化。

样品前处理

·匀浆与提取：将冷冻样品进行快速研磨，随后加入提取溶剂（如甲醇、乙腈或含水的有机溶剂），通过涡旋或超声波辅助提取内源激素。

·净化与浓缩：提取液需要通过固相萃取（SPE）或其他净化技术去除蛋白质、脂质等杂质，随后浓缩至所需体积，以提高检测灵敏度。

液相色谱分离

·将处理后的样品注入液相色谱系统，通过色谱柱（通常为反相柱）进行分离。选择合适的流动相（如水和有机溶剂的混合物，可能包含酸或缓冲液以调节pH），以优化目标激素的保留时间和分离效率。

质谱检测

·样品经色谱分离后，进入串联质谱仪，首先通过电喷雾电离（ESI）转化为带电粒子。

·在第一级质谱（MS1）中，根据m/z比筛选出目标激素的母离子。

·母离子随后在碰撞室中经历碰撞诱导解离（CID），生成一系列特征子离子。

·第二级质谱（MS2）检测这些子离子，通过比较母离子和子离子的m/z比，实现对目标激素的高特异性识别。

数据分析

·使用专业软件处理质谱数据，基于保留时间和特征离子对匹配，确认激素的种类。

·通过与标准品的响应进行比较，计算出样品中激素的绝对或相对含量。

结果验证与报告

·分析结果应通过平行实验或重复测量进行验证，确保数据的可靠性和一致性。

·将所有检测信息整理成报告，包括样品信息、检测方法、激素种类、含量及其可能的生理意义。

样本要求

采集的样品，均应在短时间内进行分析检测，如不能及时分析检测的则需要进行处理和保存，一般应遵循的原则是：环境干燥、温度较低、避免光照、密封保存。

鲜样：取样后立即放入用于包装样本的铝箔或冷冻保存管（提前进行编号）并放入液氮速冻，-80℃超低温冰箱保存，足量干冰邮寄运输，避免反复冻融。

烘干样：取样后用柔软湿布擦净，不应用水冲洗。尽快晾干并将样品置于105 ℃的烘箱中烘 15min以终止样品中酶的活动。经过杀青之后，应立即降低烘箱的温度，维持在70 ～80℃，直到烘至恒重。若测定样品中金属元素的含量，应注意金属器械的污染问题，以防干扰。

汉广提供“一站式”检测服务，您只需要提供样本原样，汉广会严格按照国标或行标，进行样本前处理、指标检测，数据统计、报告编写等工作，减少科研工作者的工作量。

取样前，请与业务经理沟通您的检测需求，确认样品类型以及寄样方式，以免影响检测数据的真实性，造成时间及成本的损失！

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