蛋白质和氨基酸是生物体的重要组成部分，它们在动植物的生长、发育、代谢和生理功能中发挥着关键作用。在动植物理化检测中，蛋白质及氨基酸的检测具有以下几个方面的价值：

营养价值评估

蛋白质是生命的物质基础，是构成生物体细胞组织的重要成分。通过检测植物各部分中蛋白质的含量，可以评估其营养价值，这对于食品和饲料的质量控制尤为重要。

品种改良和育种

蛋白质含量的测定可以帮助农业生产者选择优良品种，进行品种改良和育种工作。不同作物的蛋白质含量水平不同，通过检测可以筛选出具有高蛋白质含量的品种，从而提高作物的产量和品质。

生长条件优化

植物在不同的生长阶段对氮的吸收和利用不同，蛋白质的含量也随之变化。通过检测可以了解植物对氮的需求量，从而优化肥料使用和灌溉条件，提高作物的生长效率。

食品加工和质量控制

在食品加工过程中，蛋白质的含量和质量直接影响产品的口感、色泽和营养价值。通过检测可以确保食品加工过程中蛋白质的稳定性，保证产品质量。

疾病诊断和预防

蛋白质和氨基酸的异常变化往往与某些疾病的发生有关。通过检测可以早期发现潜在的健康问题，为疾病的诊断和预防提供科学依据。

检测指标

样品采集

1. 样品类型

植物样品：可以是叶片、种子、果实、根系等不同部位，具体取决于检测目的。

动物样品：包括肌肉组织（肉类）、血液、乳制品、蛋类等，同样根据检测需求选择。

2. 采样工具与容器

使用干净、无菌的采样工具，如一次性手套、剪刀、镊子等，避免污染。

样品应放入预先标记好的无菌容器中，如自封袋、离心管或玻璃瓶。容器需干燥、清洁，最好为一次性使用，以减少交叉污染的风险。

3. 样品处理

快速冷冻：对于需要保持蛋白质活性或减少降解的样品，采集后应立即放入液氮或干冰中快速冷冻，然后转移至-80°C冰箱长期保存。

防腐剂添加：某些情况下，可向样品中加入少量防腐剂，如甲醛溶液（注意使用安全），但需谨慎使用，因为这可能影响后续的分析结果。

干燥保存：对于一些稳定性较高的样品，可以通过自然风干或使用干燥器进行干燥，然后密封保存。

4. 样品量

确保采集足够量的样品，一般建议至少5克以上，以便进行重复检测或后续的实验需求。

5. 样品标识

每个样品都应有清晰的标识，包括样品名称、采集日期、采集地点、采集人等信息，以便于追溯和管理。

6. 安全与伦理

在采集动物样品时，应遵循动物福利原则，确保操作过程中动物不受不必要的痛苦。

对于含有潜在病原体的样品，如某些动物组织，应采取适当的安全防护措施，遵守实验室安全规定。

7. 快速送检

尽快将样品送至实验室进行检测，尤其是对于需要保持新鲜度的样品，避免长时间存放导致蛋白质变性或氨基酸降解。

如何避免样品在储存过程中发生蛋白质变性或氨基酸降解

控制温度：低温条件下，蛋白质降解的速率降低，可以有效避免蛋白质发生变性。在-80℃甚至更低的温度下，蛋白质的保存时间更久。

选择合适的保存溶液：蛋白质保存的溶液应该不与蛋白质发生作用，以保证蛋白质的空间结构完整性。常用的保护剂包括甘油或DMSO（二甲基亚砜）。

避免化学和物理因素的影响：避免使用能够引起蛋白质变性的化学试剂，如强酸、强碱、重金属盐、尿素、乙醇、丙酮等。同时，避免加热、紫外线照射、超声波、剧烈振荡或搅拌等物理因素的影响。

使用冻干技术：对于难以在低温下稳定保存的蛋白质，可以采用冻干技术，将蛋白质样品转化为固态，减少水分含量，延长保存时间。

样品前处理

1. 样品破碎/匀浆

植物样品：使用研磨器或匀浆机将样品磨碎成粉末或浆状，有时会加入石英砂或玻璃珠以助于细胞壁的破碎。

动物样品：肌肉组织等硬质样品可以先冷冻硬化再切碎，随后在液氮下进一步研磨；血液或细胞悬液可以直接进行匀浆。

2. 蛋白质提取

提取缓冲液：选择适合的缓冲液，如磷酸盐缓冲液（PBS）、Tris-HCl缓冲液等，根据样品类型调整pH值和离子强度，以保证蛋白质的稳定性和溶解性。

抑制剂添加：为了防止蛋白酶的活性，通常会在提取缓冲液中加入蛋白酶抑制剂，如PMSF（苯甲基磺酰氟）或EDTA。

提取过程：将样品与提取缓冲液混合，通过振荡、超声波等方式加速蛋白质的溶解，必要时可通过离心去除不溶性颗粒。

3. 蛋白质定量

在进行进一步的分析之前，通常需要进行蛋白质定量，以确保后续实验中蛋白质浓度的准确性和一致性。常用的蛋白质定量方法有BCA法、Bradford法等。

4. 蛋白质消化

酶解：对于蛋白质检测，常使用胰蛋白酶等蛋白酶将蛋白质消化成小肽段，便于后续的质谱分析。

还原与烷基化：在某些情况下，需要先通过β-巯基乙醇等试剂还原二硫键，再用碘乙酰胺等试剂进行烷基化，以保护半胱氨酸残基。

5. 氨基酸衍生化

对于氨基酸检测，样品中的游离氨基酸或消化后的肽段需经过衍生化处理，使其荧光或吸收性质改变，以提高检测的灵敏度。

6. 样品净化与浓缩

使用固相萃取（SPE）、凝胶过滤色谱（GFC）等技术去除样品中的杂质，通过真空浓缩或冷冻干燥等方式浓缩样品，提高待测组分的浓度。

7. 样品储存

处理完成的样品应根据后续检测的要求，在适当的条件下储存，如-80°C冰箱，以保持样品的稳定性。

在进行蛋白质和氨基酸的样品前处理时，需要注意以下几点：

·确保使用的试剂和溶剂纯净，以避免引入额外的杂质。

·在处理过程中要严格控制温度和时间，以免影响蛋白质或氨基酸的稳定性。

·对于特定的氨基酸，如色氨酸，可能需要采用碱水解，而不是酸性水解，以避免破坏。

·在进行氨基酸的衍生化处理时，要选择合适的衍生化试剂，并注意反应条件，以确保反应的完全性和产物的稳定性。

点击进入【学院】查看动/植物样品的采集制备与保存运输。

样本要求

采集的样品，均应在短时间内进行分析检测，如不能及时分析检测的则需要进行处理和保存，一般应遵循的原则是：环境干燥、温度较低、避免光照、密封保存。

鲜样：取样后立即放入用于包装样本的铝箔或冷冻保存管（提前进行编号）并放入液氮速冻，-80℃超低温冰箱保存，足量干冰邮寄运输，避免反复冻融。

烘干样：取样后用柔软湿布擦净，不应用水冲洗。尽快晾干并将样品置于105 ℃的烘箱中烘 15min以终止样品中酶的活动。经过杀青之后，应立即降低烘箱的温度，维持在70 ～80℃，直到烘至恒重。若测定样品中金属元素的含量，应注意金属器械的污染问题，以防干扰。

汉广提供“一站式”检测服务，您只需要提供样本原样，汉广会严格按照国标或行标，进行样本前处理、指标检测，数据统计、报告编写等工作，减少科研工作者的工作量。

取样前，请与业务经理沟通您的检测需求，确认样品类型以及寄样方式，以免影响检测数据的真实性，造成时间及成本的损失！

服务流程

检测仪器